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液相色譜儀分析的改善分離條件

   

在液相色譜儀定量分析中，分離開是首要要求。基線分合是需要準確后果的有效保證含有5個組分或者更少的樣品，使譜峰之間到達分數線結合（R＞1.5)正常較為簡單。

液相色譜儀

分離度會隨色譜柱的使用時間逐步降低，也會由于分離條件的微小波動而在不同時間有所變化，因此在建立簡單混合物的分離方法時，好使R≥2。

這樣的分離度將有利于改善測試精度和方法的普適性；含10團種或10種以上組分的樣品，分離一般會很困難，目標分離度往往必須降低至R＞1.0—1.5。

有些HPLC測定不必使全部被測組分達到基線分離，這種情況常見于所測樣品中可能存在數種化合物但僅需檢測其中的一種時。比如在普查水或土壤樣品中的某污染物(如定性分析不同的除芳劑)時，僅需要分離出個別除莠劑，確定其特征保留時間進行峰鑒別即可。 

盡管大多數HPLC設備能在更高的壓力下工作，使用新色譜柱的工作壓力不應超過170bar（2500psi,17MPa），壓力上限好在2000psi以下。

限制該壓力基于兩點原因：第一.隨著色譜柱的使用，微粒雜質會逐步堵塞柱頭，使柱壓成倍升高；

第二.較低的壓力（<170bar）適于泵、進樣閥、尤其是自動進樣裝置的穩定工作密封墊的壽命更長，液相色譜儀色譜柱堵塞的情況減少，系統的耐久性明顯提高。因此，好以小于泵的大允許壓力的50%作為目標壓力。